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中草药三叶青抗肿瘤作用机制实验研究和临床应用
发布时间:2013-10-12 10:41   来源:未知   作者:xghl
来源:《医学研究杂志》 2007年11月 第36卷 第11期
作者:魏克民 丁刚强 浦锦宝 梁卫青 郑军献 胡轶娟 祝永强

摘 要:目的 拟对民间常用中草药三叶青抗恶性肿瘤作用机制做深入的实验研究,并在此基础上按《保健食品注册管理办法(试行)》要求以三叶青为主,配以药食同用的黄芪、人参皂苷制成制剂金芪片经过临床验证研制成抗恶性肿瘤的功能性保健食品。方法 按《保健食品检验与评价技术规范》对三叶青进行抗肿瘤功能实验、提高人体免疫功能实验和食品安全性毒理学评价实验,证实三叶青有明显抗肿瘤作用,且长期服用安全无毒。结果 各项实验结果证实三叶青对人体肝癌细胞HepG2 活性具有较强抑制作用,对小鼠HepG2 细胞的端粒酶基因表达有抑制作用,并又增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能的作用。三叶青提取物经急性毒性试验及长期毒性实验证实安全无毒。结论 表明三叶青对恶性肿瘤病人有较好的效果,值得推广,并可期盼做进一步研究开发成抗恶性肿瘤新药。
关键词:三叶青;恶性肿瘤;免疫;细胞凋亡
 
     中医中药的推广应用为恶性肿瘤的防治开辟了广阔的前景,是我国在肿瘤防治独具特色的有效方法。近5年来我们浙江省中医药研究院中药资源重点学科和浙江省疾病防治控制中心对中草药三叶青抗恶性肿瘤作用机制作了较深入的实验研究,并做了临床验证,积累了一定的科研资料,试着以三叶青为主要原料开发研制成一个具有确切疗效、无明显不良反应、使用安全、有中国特色的新一代防治恶性肿瘤的治疗药物。
     三叶青为葡萄科崖爬藤属植物,学名为三叶崖爬藤Tetrastigm a Hem sleganum Diels et. Gilg. ,又名金钱吊葫芦、蛇附子、三叶对、小扁藤、三叶扁藤、拦山虎、雷胆子,主要分布于我国西南及浙江、江西、安徽、福建、台湾、湖北、湖南、广东、广西等省区。三叶青以块根或全草入药。具有清热解毒、祛风化痰、活血镇痛等功效。用于治疗高热惊厥、肺炎、哮喘、肝炎、风湿、月经不调、咽痛、瘰疬、痈疔疮疖及恶性肿瘤,均具有很好的疗效[ 1 ~ 3 ] 。
     三叶青的化学成分,从其石油醚萃取物中已分离出4个化合物:蒲公英萜酮、蒲公英萜醇、β- 谷甾醇、麦角甾醇[ 3 ] 。经实验研究证实三叶青提取物对人体肝癌细胞HepG2活性具有较强的抑制作用,对小鼠HepG2细胞的端粒酶基因表达具有抑制作用,而对正常原代培养的大鼠肝细胞活性没有明显毒性作用。三叶青提取物具有增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能的作用,并对K562和A549细胞周期具有阻滞作用,对K562和HepG2细胞促进凋亡作用,在蛋白质水平和mRNA水平对K562细胞中促凋亡基因BAX均有上调作用,对K562细胞和HepG2细胞增生和端粒酶基因的表达具有显著抑制作用,由此表明三叶青具有明显的抗肿瘤作用[ 1 ] 。
     三叶青按《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中“食品安全性毒理学评价试验”进行实验,结果表明急性毒性试验小鼠经口LD50 > 20g/kg,属实际无毒,长期毒理学研究结果证实:三叶青的大鼠30日喂养试验,未见试验动物出现中毒症状,大体解剖及组织学观察未见异常病理改变。对大鼠体重、进食量、食物利用率、血象、血生化均无明显影响。三叶青高剂量组雌、雄性动物的剂量为人体推荐剂量[ 60mg/ ( kg·d) ]的120倍[ 4,5 ] 。证实中草药三叶青长期服用安全无毒。
     根据卫生部颁发的《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的“保健食品功能学评价程序和检验方法规范”对三叶青进行增强免疫力功能检验。结果:(1)实验动物的体重、胸腺/体重比值和脾脏/体重的检测结果表明,三叶青(相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、20倍)对动物的体重、胸腺/体重比值和脾脏/体重比值未见明显影响。( 2 ) ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验结果表明,三叶青具有增强小鼠细胞免疫功能的作用。( 3)二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验结果表明三叶青具有增强小鼠细胞免疫力功能的作用。( 4)抗体生成细胞检测试验结果表明:三叶青对小鼠体液免疫功能未见明显影响。(5)血清溶血试验测定结果表明:三叶青对小鼠体液免疫功能未见明显影响。( 6)小鼠碳廓清试验结果表明:三叶青具有增强小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的作用。( 7)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果表明:三叶青具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。(8)NK细胞活性测定试验结果表明:三叶青具有增强NK细胞活性的作用。以上8项试验表明三叶青具有增强免疫力功能作用。
 
讨  论
恶性肿瘤治疗目前在医学界尚无理想的药物和方法。在人类对此疾病药物耐受性日益严重的同时,中医中药及有关营养支持疗法为治疗恶性肿瘤开阔了一条充满希望的崭新的通道。我们利用我国特有的中草药三叶青进行抗恶性肿瘤机制的实验研究,结果表明三叶青提取物对人肝癌细胞HepG2活性具有较强抑制作用,对肿瘤细胞具有很好的细胞毒作用。而对正常原代培养的大鼠肝细胞活性没有明显影响。说明三叶青对防治恶性肿瘤确有一定作用,值得进一步实验研究和临床验证,为中草药防治恶性肿瘤开拓了可喜前景。
 
参考文献
1 赵永伟,《三叶青的生药学鉴定》,基层中药杂志,1998, 12 (3):7 - 8
2 黄真,《三叶青提取物抗炎、镇痛及解热作用的实验研究》,中国新药杂志,2005,14 (7):861 - 864
3 刘东,《中国特有植物三叶青化学成分的研究》,中国中药杂志,1999,24 (10):611 - 612
4 王玲,《黄芪提取物免疫调节作用的实验研究》,军医进修学院学报,2005,26 (4):293 - 295
5 李卫平,《人参皂甙的免疫调节作用》,安徽医科大学学报,1998,33(5) :348 - 350 (收稿:2007 - 05 - 17)
 
 

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